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畜藥專家解析豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）

時(shí)間：2015-10-09 來源：迅達(dá)康獸藥

    畜藥專家表示，目前，在建立有效的預(yù)防、控制和消除豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）的方面，國(guó)家并沒有投資大量的財(cái)力和精力，那么，獸醫(yī)是如何看待PRRS的診斷呢？

    PRRS是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的母豬繁殖障礙以及各年齡豬呼吸道癥狀為主要特征的高度接觸性傳染病，該病在臨床上可引發(fā)病豬耳部發(fā)紺呈藍(lán)紫色，故俗稱“藍(lán)耳病”。它是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的一大疾病，并且給全球養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，據(jù)估算，PRRS每年對(duì)美國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)6.64億美元。

    為了應(yīng)對(duì)PRRS的爆發(fā)，最為重要和關(guān)鍵的是開發(fā)可靠、準(zhǔn)確和快速的診斷方法及程序。隨著技術(shù)的發(fā)展，獸醫(yī)和養(yǎng)豬行業(yè)相關(guān)者采取更可靠的診斷技術(shù)，以保持養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展為重中之重。

　　選擇合適的PRRS診斷方法

    依據(jù)診斷目的選擇合適的診斷方法。診斷目的包括：檢測(cè)豬場(chǎng)豬只感染狀況，確定該豬場(chǎng)此病毒流行現(xiàn)狀，確定豬場(chǎng)病毒暴露及疫苗使用情況或評(píng)估該豬場(chǎng)感染時(shí) 間。診斷目的的確定，決定了我們應(yīng)該選擇監(jiān)測(cè)什么樣的豬只樣本，樣本的數(shù)量及豬只采樣。此外，值得注意的是，由于各豬只感染時(shí)間可能不同，所以豬只個(gè)體感染狀況是無法反應(yīng)全群的感染現(xiàn)狀的。

　　選擇PRRS診斷的合適樣本的大小

　　PRRS診斷時(shí)，選擇合適大小的樣本量，是需要考慮很多因素的。比如，為了檢測(cè)到至少一個(gè)陽性樣本，則應(yīng)考慮豬群的大小、預(yù)期的豬群疾病流行情況、檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、檢測(cè)方法的敏感性和特異性。

　　檢測(cè)時(shí)間也很重要，感染和免疫的不同方面，如病毒血癥，病毒隱蔽期，抗體反應(yīng)期，損傷期等，是在疾病發(fā)展的不同時(shí)間才出現(xiàn)的。

　　選擇正確的組織樣本

    目前，關(guān)于診斷，大致分為兩個(gè)方面：病毒抗原的檢測(cè)、宿主暴露于病毒情況的檢測(cè)。病毒抗原的檢測(cè)，需要收集病毒嗜性組織，如支氣管灌洗液、胸液、精液、血液、唾液或環(huán)境樣本，然而，病毒暴露情況的檢測(cè)，需要檢測(cè)血液、唾液或肌肉滲出液中PRRSV抗體情況。因此，診斷組織樣本的采集，是要依據(jù)很多因素才能確定的，包括特定的檢測(cè)目的，診斷方法的選擇及設(shè)備的具備情況。

　　診斷技術(shù)

　　在未成功分離PRRSV之前，該病的診斷主要靠病豬典型的臨床癥狀，特征性組織學(xué)病理變化，特別是間質(zhì)性肺炎，當(dāng)然要排除其它已知能引起豬繁殖障礙和呼吸道癥狀的病原。

　　目前常根據(jù)臨床癥狀、組織病理學(xué)變化、病毒的分離鑒定以及血清學(xué)方法等結(jié)果進(jìn)行綜合診斷：

    （1）臨床診斷：因?yàn)镻RRSV感染豬只后存在大量的亞臨床感染，故臨癥狀是診斷該病的首要條件。但是不同豬群發(fā)病后的臨床癥狀有所不同，只有暴發(fā)急性PRRS時(shí)，臨床診斷的意義才更大。

    （2）組織病理學(xué)檢查：在未發(fā)生繼發(fā)感染的情況下，感染豬只一般不發(fā)生明顯肉眼可見的病理變化，此時(shí)需要進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。組織病理學(xué)檢查主要適用于發(fā)病仔豬，對(duì)母豬、流產(chǎn)胎兒和育肥豬意義不大。豬感染PRRSV后典型的組織病理學(xué)變化是間質(zhì)性肺炎，在感染豬只中，有時(shí)還會(huì)見到鼻炎、腦炎和心肌炎等組織病理變化。

　�。�3）病毒檢測(cè)：用于病毒分離的細(xì)胞有原代PAM、CL2621和MARC-145。不同的毒株對(duì)不同的細(xì)胞有所選擇，但大多數(shù)毒株，特別是從血清中分離病毒都可用原代 PAM。根據(jù)病毒的培養(yǎng)特性，電鏡觀察，再綜合臨床癥狀及病理學(xué)檢測(cè)即可作出初步診斷。但還需要進(jìn)行血清學(xué)方法和分子生物學(xué)方法進(jìn)行確診。血清學(xué)技術(shù)主要包括免疫過氧化物酶單層試驗(yàn)（IPMA）、間接免疫熒光抗體試驗(yàn)（IFA）、血清中和試驗(yàn)（SN）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、乳膠凝集試驗(yàn) （LAT）、膠體金標(biāo)記技術(shù)等，其中，IDEXX的ELISA技術(shù)是目前應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)PRRSV抗體的方法，間接免疫熒光抗體試驗(yàn)（IFA）和血清中和試驗(yàn)（SN）也經(jīng)常被用到。常用的分子生物學(xué)檢測(cè)方法主要有反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）、套式PCR技術(shù)、實(shí)時(shí)RT-PCR、核酸探針原位雜交技術(shù)（ISH）及序列測(cè)定。利用RT-PCR方法可以特異性檢測(cè)血清、精液和組織中的病毒RNA。ORF5序列測(cè)定經(jīng)常用來進(jìn)行毒株鑒定和變異分析，且相關(guān)的數(shù)據(jù)庫(kù)已經(jīng)建立。

　　公豬的血樣或精液，出生仔豬的臍帶，斷奶仔豬的血樣及死豬的組織病料均可用于PRRSV的實(shí)驗(yàn)室診斷。近期的研究表明口腔分泌物是血樣外的另一樣品選擇�？谇环置谖锸峭僖汉妄l溝液的混合物，其比唾液更接近血樣�？谘史置谖锏牟杉奖悖踩覍�(duì)動(dòng)物沒有創(chuàng)傷�；� 口咽分泌物的診斷方法包括ELISA，RT-PCR等。為提高檢測(cè)的敏感性，熒光微球免疫試驗(yàn)可用于檢測(cè)口腔分泌物和血清中的不同抗原和抗體。在傳統(tǒng)的抗體檢測(cè)中主要檢測(cè)PRRSV的N蛋白抗體，但一些非結(jié)構(gòu)蛋白，如Nsp1α、Nsp1β、Nsp2和Nsp7亦可作為診斷PRRSV感染的指標(biāo)。

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